2017卫生资格《检验技士》复习笔记
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细胞酶的释放影响因素
细胞靠细胞膜来维持其完整性，细胞膜代谢十分活跃，依靠膜上一系列ATP依赖的离子泵来维持细胞内外Na+、K+和Ca2+浓度的差异，这过程需要耗费大量能源，当缺氧或能量代谢障碍、ATP供应减少、离子泵功能障碍时，无法维持正常离子的梯度差，改变了细胞的内渗透压，从而引起细胞肿胀，特别是Ca2+进入细胞内，引起细胞膜的泡状突出，膜孔隙增大，酶开始从细胞内向外溢出，其速度和数量受多种因素影响。
主要的有：
⒈细胞内外酶浓度的差异
对于非血浆特异酶，细胞内外浓度差可在千倍以上，因此只要有少量细胞坏死或者细胞有轻度病变，血中酶浓度就可能明显升高。有人计算过只要有1/1000肝细胞坏死，所释放的.酶可使血中酶增加一倍。鸟氨酸氨甲酰基转移酶(OCT)在细胞内外浓度差异可达到105：1，此酶在肝脏病变时变化极为明显，可惜的是，由于测定方法不方便，临床应用不多。但对于血浆特异酶而言，由于细胞内外浓度差异小，细胞病变很少引起血中酶浓度明显升高。
⒉酶在细胞内定位与存在形式
从上述酶释放的机制不难理解最容易释放入血的是胞质中游离的酶，如ALT，LD等。而在细胞亚显微结构中的酶则较难溢出，除非细胞病变进一步加重，不局限于细胞膜。特别是线粒体酶，由于有两层致密的线粒体膜，往往当细胞出现坏死病变时，才开始释放入血。在一个典型的AMI病程中，线粒体AST是最后一个出现升高的酶，而且到达峰值时间也最迟。临床通过线体酶的测定，有助于判断疾病的不良预后。又如肝细胞中AST大部分存在于线粒体，虽然其绝对量超过ALT，但在急性肝炎时，由于细胞病变较轻，胞质中含有大量ALT，故血中ALT往往超过AST.而在肝硬化时，主要病变为肝细胞坏死，线粒体中AST大量溢出，血中往往AST大于ALT.
细胞膜上也含有多种酶，如γ-谷氨酰基转移酶(GGT)大量存在于肝中毛细胆管上皮膜上，当胆道梗阻、胆汁潴留在肝中时，胆汁酸盐有表面活性剂作用，可将GGT从细胞膜上洗脱下来，而此时不一定伴有细胞膜病变。正因为血中不同酶变化机制有差异，这样GGT和ALT在各种肝胆疾病时的变化常不一致。
⒊酶蛋白分子量的大小
不少实验都证实酶的释放速度大致与酶的分子量成反比。由于临床上测定的十余种酶之间分子量差异不太大，此因素对血中酶浓度高低影响恐不如上述因素，但对酶在血中出现升高时间先后有相当大影响。例如在AMI时，血中最先升高的CK分子量为85000，而分子量为125000的LD出现升高明显推迟。
白细胞计数知识总结
一、检测原理
白细胞计数是测定单位体积血液中各种白细胞总数。包括显微镜计数法和血液分析仪计数法。
二、方法学评价
1、显微镜计数法：
简便易行、不需昂贵仪器，但重复性和准确性较差，受微量吸管、血细胞计数板、细胞分布、人为因素等多种情况影响。
2、血液分析仪计数法：
计数细胞数量多、速度快、易于标准化、计数精确性较高，适合大规模人群健康筛查，但需特殊仪器。某些人为因素(如抗凝不充分)、病理情况(如出现有核红细胞、巨大血小板、血小板凝集等)可干扰白细胞计数。使用前须按NCCLS规定方法对仪器进行校准，且须认真坚持日常质控工作。
三、参考值
血细胞自动计数仪、显微镜计数法：
成人：(4.0～10.0)×109/L (4000～10000/mm3).
新生儿：(15.0～20.0)×109/L(15000～20000/mm3).
婴儿：(15.0～20.0)×109/L.
儿童：(5.0～12.0)×109/L.
四、临床意义
1.生理变化
(1)年龄：新生儿计数较高，可达(15～30)×10^9/L，通常在3～4d降至10×10^9/L.(2)日间变化：一般安静松弛时白细胞较低，活动和进食后较高;早晨较低，下午较高，一日之内可相差1倍。
(3)运动、疼痛和情绪影响：剧烈运动、剧痛、极度恐惧等均可使白细胞短时升高。
(4)妊娠与分娩：妊娠期特别是最后1个月白细胞升高，分娩时可达34×10^9/L，产后2～5d恢复正常;女性绝经期、月经期则可降低。
(5)饮酒、大量吸烟、冷浴亦可升高由于生理因素，同一检测对象白细胞计数甚至可波动50%.
2.病理变化
(1)升高：
①各种球菌引起的急性感染及化脓性炎症：中耳炎、扁桃体炎、阑尾炎、脓肿等;
②全身感染：肺炎、败血症、猩红热等;
③中毒：尿毒症、糖尿病酸中毒、汞中毒、铅中毒;
④急性出血、急性溶血、手术后;
⑤恶性肿瘤、粒细胞血液病等;
⑥类白血病反应。
白细胞在20×10^9/L以上，说明存在严重感染。
(2)降低：
①病毒感染：重症肝炎、流行感冒、麻疹等;
②某些传染病：如伤寒、副伤寒、疟疾等;
③某些血液病如再生障碍性贫血、白细胞减少性白血病、粒细胞缺乏症;
④化学药品及放射损害如X线照射、镭照射、晚期砷中毒等;
⑤自身免役性疾病及脾功能亢进等。
白细胞在2.5×109/L以下，是传染病、中毒和骨髓再生障碍的重要危险值。
氯的测定之滴定法
(1)Molrr法：以K2CrO4为指示剂，用AgNO3滴定血清中Cl-，以过量的Ag+与CrO42-结合出现Ag2CrO4红色沉淀为终点，根据AgNO3消耗量计算出标本中Cl-的量。
(2)Sehales法：以二苯卡巴腙作指示剂，用Hg(NO3)2滴定血清中Cl-，以过量的Hg2+与二苯卡巴腙结合成不溶的紫蓝色化合物为终点，根据Hg(NO3)2消耗量计算血清Cl-的量。
滴定法需要熟练的操作，终点要准确，尽可能排除主观因素的干扰，否则误差很大。
血清中过多的胆红素。血脂及血红蛋白(溶血)对结果干扰很大。滴定法有淘汰的趋势。
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